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凝膠成像分析系統(tǒng)用于其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析
加入日期:2023.02.01   瀏覽次數(shù):2231次    字體大小:       
科學(xué)技術(shù)迅速發(fā)展的今天,凝膠電泳作為非常重要的科研實驗方法早已被廣泛應(yīng)用于蛋白和核酸的分離。而電泳圖像的采集、保存和相關(guān)處理分析主要依靠凝膠成像系統(tǒng)。   總體上來說凝膠成像可應(yīng)用于:凝膠成像分析系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。   (1)分子量定量   對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計要準(zhǔn)確很多。   (2)密度定量   一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。   (3)密度掃描   在分子生物學(xué)和生物工程研究中,**常用到的是對蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。   (4)PCR定量   PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴(kuò)增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
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